产品货号:
KFS318
中文名称:
XTT细菌增殖及毒性检测试剂
英文名称:
XTT Bacteria Proliferation and Cytotoxicity Kit
产品规格:
500T|1000T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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XTT(二甲氧唑黄)是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,活细菌中存在与辅酶Ⅱ相关的脱氢酶,可将黄色的XTT还原成水溶性的橘黄色的甲月赞。生成的甲臜能够溶解在组织培养基中,不形成颗粒,可直接用酶联免疫检测仪检测定吸光值。
组分 | 500T | 1000T |
XTT溶液 | 10mL | 20mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃,避光,避免反复冻融,有效期1年。
低速离心机、酶标仪(450nm波长)、平板摇床、微量移液器、96孔板。
- 本制品应避免反复冻融,4℃避光可以保存6个月。
本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,如果待检测体系中存在较多的还原剂,例如一些抗氧化剂会干扰检测,需设法去除。 - 如果待测溶液有还原性,测定不含细菌,但含有XTT的待测溶液在450nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入XTT,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用培养基洗涤细菌两次,然后加入新的100μL培养基和20μL XTT工作液进行检测。
- 用酶标仪检测前请确保孔内没有气泡,否则会干扰测定。
- 为保证您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 96孔板加入细菌100μL/孔(约1×104),置37℃ 5% CO2细菌培养箱培养24小时。
- 加入适当浓度的受试化合物。
- 将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细菌培养箱中孵育适当时间。
- 向各孔中加入20μL的XTT工作液。
- 37℃下孵育1~4小时。
- 酶标仪在450nm波长处检测每孔的光密度。
- 结果分析
- 细菌的存活率:将各测试孔的OD值减去本底OD值(完全培养基加XTT工作液,无细菌)或空白药物孔OD值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加XTT工作液,无细菌),各重复孔的OD值取均数±SD。细菌的存活率以T/C%表示,T为加药细菌的OD值,C为对照细菌的OD值。
细菌存活率% =(加药细菌OD/对照细菌OD)×100 - 求出T/C = 50%时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
- 细菌的存活率:将各测试孔的OD值减去本底OD值(完全培养基加XTT工作液,无细菌)或空白药物孔OD值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加XTT工作液,无细菌),各重复孔的OD值取均数±SD。细菌的存活率以T/C%表示,T为加药细菌的OD值,C为对照细菌的OD值。
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